PCR擴增產(chǎn)物克隆的實驗要點
PCR擴增產(chǎn)物克隆的實驗要點 | 時間: June-2 14:46:48 | 分類:技術(shù)欄目
凌儀生物提供高速離心機，美國Bio-rad伯樂電泳，德國eppendorf艾本德移液器，美國ABI基因擴增儀PCR，雅培原位雜交儀，Thermo熱電離心機等實驗室儀器設(shè)備，以及Corning康寧，Axygen愛思進，Greiner格瑞拉等耗材要省錢，別錯過哦。引物設(shè)計主要是要注意以下幾個事項：
?。?）發(fā)夾結(jié)構(gòu)；
?。?）反向配對；
?。?）GC含量（40－60%）；
?。?）退火溫度（45－65度）；
?。?）引物長度（18－27bp）；
?。?）3' 端較好是C、G（提高結(jié)合度）；
?。?）引物在序列中的錯配位點。
大致就這幾個方面，重要性依次降低，由其是3' 端絕對不能形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。那么你說你這段能不能設(shè)計引物呢？其實設(shè)計引物都只是好中選優(yōu)的問題。
